活细胞成像
使用Vutara的活细胞单分子定位显微镜
生物成像需要观察细胞内的动态结构;无论是可视化单个生物分子在细胞(粒子跟踪)或观察生物过程，如膜，细胞器或细胞骨架运动。
的Vutara VXL显微镜的能力是理想的活细胞单分子定位显微镜:
- 使用专利双平面技术进行3D定位-每张图像有1µm的3D数据-不需要使用Z系列
- Z系列可扩展轴向范围
- 快速采集-高达800fps的全帧，和高达3000fps的更小的ROI
- 灵敏探测器-冷却科学CMOS相机
粒子跟踪
Vutara VXL显微镜是为单分子定位显微镜设计的，因此是粒子跟踪实验的理想设计。Vutara在高速和三维成像单个荧光团的固有能力使其成为粒子跟踪的理想选择。样品可以用有机染料、蛋白质或量子点标记，并使用Vutara VXL的高速和灵敏相机成像。Vutara的SRX软件内置粒子跟踪算法，可在多帧中跟踪荧光团。这是单分子定位显微镜在基于图像的超分辨率显微镜(如STED或SIM)上的一个强大而独特的特性。SRX软件还包括一个全面的粒子跟踪统计包，用于分析您的数据。
在左边，我们可以看到一个用量子点标记的EGF受体的扩散。
细胞成像
Vutara VXL显微镜是为单分子定位显微镜设计的，能够在有意义的时间尺度上捕捉生物运动。这种独特的成像方式允许用户收集感兴趣结构的动态超分辨率图像，同时也为用户提供每个分子随时间的精确3D位置。这突出了单分子定位显微镜的独特成像方式，并将其与基于成像的超分辨率技术区别开来。
在右边，我们看到两个监测活细胞线粒体动态的实验。一种用橙色HaloTag®染料(549)成像，另一种用光活化远红染料(PA-JF-646®)标记。
结合粒子跟踪和细胞成像
Vutara VXL显微镜能够进行多色单分子成像，允许进行一些独特的实验设计。左边显示的是表达tomm-20::HaloTag®的细胞的两种颜色实验。在本实验中，tomm20::HaloTag®用密集浓度的JF549®和非常稀疏浓度的PA-JF646®标记。这使得密集染料可以作为背景标记，随着时间的推移，允许线粒体的重建和定位。而第二种染料允许跟踪单分子在线粒体环境下的扩散。使用这种技术，我们可以监测蛋白质在膜中的扩散如何随着线粒体的流动和发生融合或裂变而变化。
