活细胞成像
活细胞单分子定位显微镜使用Vutara
生物成像需要观察细胞内的动态结构;既可以可视化细胞中的单个生物分子(粒子跟踪)，也可以观察生物过程，如膜、细胞器或细胞骨架运动。
的Vutara VXL显微镜的功能是活细胞单分子定位显微镜的理想选择:
- 3D定位使用专利的双面技术-每张图像有1微米的3D数据-不采取Z系列
- 轴向范围可以扩展与Z系列
- 快速采集-全帧最高可达800帧，且ROI更小，最高可达3000帧
- 灵敏探测器-冷却科学CMOS相机
粒子跟踪
Vutara VXL显微镜专为单分子定位显微镜设计，因此是粒子跟踪实验的理想设计。Vutara的内在能力，单个荧光团在高速和三维成像，使其成为理想的粒子跟踪。样品可以用有机染料、蛋白质或量子点标记，并使用Vutara VXL的高速灵敏相机成像。Vutara的SRX软件内置粒子跟踪算法，用于跟踪多帧荧光团。这是单分子定位显微镜比基于图像的超分辨率显微镜(如STED或SIM)强大而独特的功能。SRX软件还包括一个全面的粒子跟踪统计包，用于分析您的数据。
在左边，我们可以看到用量子点标记的单个EGF受体的扩散。
细胞成像
Vutara VXL显微镜专为单分子定位显微镜设计，能够在有意义的时间尺度上捕捉生物运动。这种独特的成像方式允许用户收集感兴趣的结构的动态超分辨率图像，同时也为用户提供每个分子随时间的精确3D位置。这突出了单分子定位显微镜的独特成像方式，并将其与基于成像的超分辨率技术区分开来。
在右边我们看到两个实验监测活细胞中的线粒体动态。一个用橙色HaloTag®染料(549)成像，另一个用光活化远红色染料(PA-JF-646®)标记。
结合粒子跟踪和细胞成像
Vutara VXL显微镜执行多色单分子成像的能力允许一些独特的实验设计。左图为表达tomm-20::HaloTag®细胞的双色实验。在本实验中，tomm20::HaloTag®使用密集浓度的JF549®和非常稀疏浓度的PA-JF646®进行标记。这允许密集染料被用作上下文标记，允许随着时间的推移重建和定位线粒体。而第二种染料允许在线粒体范围内跟踪单个分子的扩散。使用这种技术，人们可以监测蛋白质在膜中的扩散是如何随着线粒体的流动和发生融合或裂变而变化的。
