蛋白定量

准确的蛋白质相对定量是定量蛋白质组学的基础之一。这对于正确理解生物组合或生物标记物面板发现实验是必不可少的。

量化更多的蛋白质

开发以满足样品限制和产量的要求

准确的蛋白质相对定量是定量蛋白质组学的基础之一。这对于正确理解生物组合或生物标记物面板发现实验是必不可少的。Bruker的蛋白质组学解决方案结合了速度、选择性、灵敏度和鲁棒性,使用户可以在有限的数量和/或较短的梯度时间内获得更多蛋白质的可靠定量信息。bob电竞安全吗

PASEF®lfq和4D-Match Between Runs (MBR):从两个世界获得最好的

非靶向蛋白定量的典型挑战是周期时间(定义色谱峰分辨率),选择离子的唯一性(选择性)和系统灵敏度(低丰度化合物的定量)。基于质谱的方法提供了全面的定量结果,但重叠离子降低了这些工作流程的选择性。基于MS/MS (DIA)的定量方法以降低灵敏度为代价,提供了良好的选择性。

TIMS-PASEF®基于无标签定量(PASEF®-LFQ)结合了这两种方法的优点。TIMS提供了一个额外的分离维度,大大增加了选择性,而TIMS细胞的预富集效应提供了更大的灵敏度。的PASEF®与传统的DDA方法相比,其循环时间与狭窄的纳米uhplc峰兼容,而其速度(>100 Hz MS/MS)大大提高了母离子选择的重现性。
在这种情况下,timsTOF Pro独特的4D-MBR方法能够以前所未有的灵敏度克服缺失值问题。

三蛋白质组混合物的无标记定量结果。总负载为150ng,用60min的梯度分离。PeaksX用于处理,珀尔修斯用于显示。

进入第四维度

在某些情况下,高度复杂的样品或短梯度分析,100 Hz MS/MS补充率不足以在大量分析中重复选择相同的离子

在这种情况下,可重复的碰撞截面测定(流动性)使4D-Match Between Runs (MBR)能够最大限度地从标签自由定量实验中定量蛋白质的数量,同时保持高通量样品分析的最高置信水平。最新的PEAKS和MaxQuant版本支持4D-MBR方法。阅读我们的相应的LC-MS154应用注释

展望未来:引入dia-PASEF®
对于数据独立采集(DIA),使用DIA - pasef®利用分子质量和迁移率之间的相关性来瞄准最密集的肽区。额外的尺寸导致选择性增加,灵敏度增加,循环时间缩短。了解更多关于如何使用dia-PASEF的信息®4d蛋白质组学™的极限,阅读我们的LC-MS157应用注释

dia-PASEF®定量结果(Processing with Biognosys 's Spectronaut™)3-蛋白质组消化的无标签实验的蛋白质水平定量结果。8500多个蛋白质被鉴定和定量,其浓度大小为5个数量级。

先进的蛋白质组学处理软件

MaxQuant数据处理
MaxQuant,流行的,强大的,开源软件完全支持PASEF®lfq数据支持高级定量,可视化和报告。

高级软件支持
越来越多的先进的蛋白质组学处理软件包现在直接读取timsTOF PRO原始数据:这包括Skyline,基因数据,完整的蛋白计量套件,吉祥物蒸馏器

峰值数据处理
PEAKS Studio从tims数据文件中进行高性能特征提取,在基于多肽的蛋白质鉴定、无标签定量和DeNovo测序中获得高质量的结果。多种复杂的可视化和导出功能允许用户查看、共享或完善多种蛋白质组学分析的结果。

为高通量临床研究做好准备

timsTOF Pro的独特能力提供了数千次注射的可持续性能,结合增强的LFQ性能,使该系统成为高通量临床研究的理想平台。

数据处理是蛋白质定量和PASEF的关键®lfq方法已经被一些最强大的软件套件所支持。

Evosep One/timsTOF Pro用于临床蛋白质组学:连续100次注射50 ng Hela细胞消化液,梯度6分钟(200个样品/天),可重复性和性能水平。左:强度相关的100跑。中间:LFQ结果说明。右图:不同浓度水平物种的可重复性测量。