细胞生物学

许多有趣的细胞结构小于~200- 300nm的光学衍射极限。这些包括大多数细胞器和所有大分子机器、通道和受体的亚结构。

询问和回答关于这些和其他结构的分子组织、相互作用和化学计量学的问题需要在光的衍射极限以下的分辨率下对标记结构进行成像。

细胞生物学中的常规显微镜技术

传统的光学显微镜方法，如广角显微镜和共聚焦显微镜，可以成像和识别特定标记的细胞结构。然而，它们的成像能力在光学衍射极限以下受到限制。另外，电子显微镜(EM)可以达到0.1-0.2 nm的横向分辨率，但细胞内分子的具体标记或定量测量非常具有挑战性。

细胞生物学的超分辨荧光显微镜

超分辨率显微镜支持对特定标记细胞结构的高分辨率成像——横向可达20纳米，沿光轴可达50纳米。因此，它弥合了传统光学和电子显微镜(EM)技术之间的差距。

_{*右:用Alexa 647染色的TOM20线粒体，用SMLM (dSTORM)成像。}

高分辨率(20纳米横向)与成像特定标记结构的能力相结合，使SMLM成为细胞生物学研究的有力解决方案。SMLM的发现包括HeLa细胞染色质域局部运动的可视化，Xenopus卵母细胞核孔复核内的八倍对称性和向心蛋白CEP164的径向九倍对称性，以及内质网内连接管状结构的组织[1、2]。

适用于SMLM研究的纳米尺度细胞结构实例

超分辨率显微镜支持对特定标记细胞结构的高分辨率成像——横向可达20纳米，沿光轴可达50纳米。因此，它弥合了传统光学和电子显微镜(EM)技术之间的差距。

在决定SMLM是否是正确的解决方案时，必须考虑到可视化感兴趣的结构所需的分辨率。给出了一些适用于SMLM成像的衍射受限结构的尺寸实例。例子包括(但不限于):

• 核孔络合物扩散通道(长度40-50nm)
• 线粒体中的类核(直径约100 nm)
• 微管(厚度24 nm)
• 核糖体(直径~20- 30nm)
• 细菌热休克蛋白DegP(直径20 nm)
• 叶绿体内的圆柱形类肾小管(直径107±26 nm)
• 小鼠细胞内吞核(直径86±2.4nm)
• 大鼠肝线粒体嵴管状段(直径30 ~ 40nm)
• 质膜小泡(直径50- 100nm)
• 细菌鞭毛钩(约55纳米长)

_{*纳米级子结构及其尺寸的例子来自“有用生物编号数据库”。链接:https://bionumbers.hms.harvard.edu/search.aspx}

在超分辨率显微镜方法中，单分子定位显微镜(SMLM)被认为是最适合细胞生物学研究的方法。

具体地说,当研究问题需要时，SMLM是研究细胞内特定纳米尺度结构的最佳方法:

• 可见距离达20nm的分子;
• 多个特定分子结构的标记;或
• 这种规模的定量数据收集。
  

SMLM已经被用来回答细胞生物学中以前未探索的问题。SMLM是在3D和高分辨率成像多个特定结构的理想选择，以及量化数据。参见下面的示例数据和描述，了解更多关于SMLM可以独特实现的研究应用程序的信息:bob平台靠谱吗

固定样本成像

在Alexa 647标记的固定微管VXL - dSTORM图像上获得微管，使用一/二次抗体标记。

活细胞成像

用Alexa 647转铁蛋白标记的活BSC1细胞的VXL -成像获得。

bob电竞安全吗Bruker的Vutara VXL提供了一流的易用性和成像深度。支持细胞生物学研究人员需求的主要特征包括:

• 自动化的工作流程:SRX软件可以很容易地获得必要的数据集，工作流程允许用户专注于生物学问题，而不是摆弄复杂的显微镜设置。
• 优越的3D成像和样品灵活性:专有的双平面检测提供了三维信息，并能够在组织切片内成像。
• 无限多路复用:集成微流体单元允许连续标记无限数量的荧光探针。
• 专家应用支持:bob平台靠谱吗Vutara VXL用户可以收到针对其研究目标的样品制备优化的个性化指导。